【细胞介绍】HepG2[HEPG2]是一种上皮样形态的细胞系，来源于一名15岁阿根廷白人男性肝细胞癌患者。该细胞能够分泌多种血浆蛋白，如清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原和铁传递蛋白等。HepG2细胞系由Wistar研究所获得，常被视为理想的转染宿主。其特点包括表达胰岛素和胰岛素样生长因子II（IGFII）。HepG2细胞的生长特性包括通常以片状增殖，最初在培养瓶壁形成小岛状结构，随后可能出现多层堆积或悬浮状态。由于具备较强的贴壁性，该细胞系广泛用于研究肝细胞功能和病毒模型。

【传代培养】HepG2细胞为贴壁生长。若细胞出现脱落，应将培养液转移至无菌离心管中，离心（125g，3-5分钟）以收集悬浮细胞。轻柔去除培养基后，利用PBS洗涤贴壁细胞，并添加胰酶进行消化。观察细胞变化，待细胞大部分脱落后，加入完全培养基中和，轻轻吹打使细胞充分解离。细胞悬液需计数后转移至培养瓶，建议T25培养瓶添加5-7ml完全培养基，之后每2-3天更换液体。

【细胞冻存】在细胞密度达到80%以上且活细胞率超95%时，需按上述步骤消化细胞并进行冻存。用适量4°C的冻存液重悬细胞，建议每瓶T25细胞冻存1管（1ml/管）。冻存管应置于-80℃超低温冰箱中过夜，若需长期保存，则应先在-80℃保存至少一天后转移至液氮罐中。

【细胞复苏】从液氮取出的细胞需在干冰中转移至细胞房，提前准备好完全培养基和其他材料。冻管需在37°C水浴中迅速解冻，解冻后用70%的乙醇消毒，随后将细胞转移至含3-6ml完全培养基的离心管中，轻柔混匀并去除培养基，再用完全培养基重悬细胞并计数，调整至适宜密度后转移至培养瓶中。

【常见问题】在培养过程中，若遇到细胞碎片过多的情况，需注意是否因培养条件不适合、营养不足或渗透压异常导致细胞内颗粒增加。可通过适当的培养条件减轻此现象。出现空泡是HepG2细胞的正常特性，不会影响生长。对于细胞生长缓慢的情况，可考虑适当增加血清比例（最高不超过20%），直至细胞恢复生长速度。

【注意事项】HepG2细胞对培养条件要求较为严格，特别是在pH值和血清质量方面。应使用高质量低内毒素且未灭活的胎牛血清，以促进圆形细胞的贴壁和单层生长。在复苏后，细胞可能存在形态不典型现象，但经过几次传代后，细胞应恢复典型的上皮细胞形态。推荐使用环亚集团·AG88的细胞培养基，以确保更好的细胞培养效果。

【科研文献】截至2024年，关于HepG2细胞的研究文献已被引用72篇，累计影响因子467.07，最高达到275。以下是部分代表性文献：

• 论文题目：Dienediamine: A safe surrogate for the herbicide paraquat 期刊：Molecular Plant 影响因子：275
• 论文题目：Photodegradation of carbon dots cause cytotoxicity 期刊：Nature Communications 影响因子：149.19
• 论文题目：Ubiquitin-specific protease 1 facilitates hepatocellular carcinoma progression by modulating mitochondrial fission and metabolic reprogramming via cyclin-dependent kinase 5 stabilization 期刊：CELL DEATH AND DIFFERENTIATION 影响因子：137.4
• 论文题目：Site-specific ubiquitination of VDAC1 restricts its oligomerization and mitochondrial DNA release in liver fibrosis 期刊：EXPERIMENTAL AND MOLECULAR MEDICINE 影响因子：128.5
• 论文题目：Accumulation of nanoplastics in human cells as visualized and quantified by hyperspectral imaging with enhanced dark-field microscopy 期刊：ENVIRONMENT INTERNATIONAL 影响因子：118