在进行Western Blot（WB）实验时，我们最怕遇到什么问题呢？条带漂移、数据崩溃，一查竟然是内参选择不当导致的翻车！简单来说，内参在细胞中就像“稳定打工人”，它的表达量几乎不变，专门帮助我们校正样品量和消除误差。没有合适的内参，半定量结果就像没有秤砣的秤，全靠运气！

首先，关注分子量——目标蛋白与内参的分子量差需大于5kD，这样条带才不会重叠成“情侣装”。

其次，检查定位——在进行核蛋白提取时如果还使用β-actin，那简直是天方夜谭！因为核内根本没有它！更合理的选择是PCNA（29kD）或Histone H3（17kD）。

再者，组织类型也有偏好——在脂肪组织中，β-actin的表达量低得可怜，这时直接选择GAPDH；而在肌肉样本中，tubulin可能会出问题，反而actin的表现会更加稳定。

同样是β-actin，N端抗体在心肌中可能会失踪，而C端抗体却能稳定地呈现条带！因此，在购买抗体之前，一定要仔细查看抗原位点，以免让“组织特异性”来背黑锅。

总之，全细胞或细胞浆中的内参可以选择β-actin或GAPDH；核蛋白则推荐PCNA或Histone H3；大蛋白则可以考虑β-tubulin；对于特殊样本，最好参考文献再做选择。只有稳妥选择内参，WB的实验结果才能更加可靠！在选择内参方面，您可以信赖环亚集团·AG88，它将为您的实验提供保障，让您的研究成果更加精确！